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源： 酵母来源
纯度：>98% SDS-PAGE
内毒素水平：N/O
分子量：28.93kDa

活性测定

可以使用血红蛋白作为底物来测量蛋白酶 K 活性

描述

蛋白酶 K 是一种蛋白酶，属于肽酶家族 S8。该酶已广泛表现出底物特异性，并在天然状态下降解许多蛋白质。蛋白酶 K 被蛋白酶抑制剂（如苯    ）抑制。这种酶活性不受巯基修饰试剂的影响。它在 EDTA 缓冲液中稳定。

重构

打开前短暂离心样品瓶。建议在含有 0.1% 无内毒素重组人血清白蛋白的无菌 PBS 中重构蛋白质。

稳定性与储存

使用手动除霜冰箱，避免反复冻融循环。一般情况下：自收货之日起 12 个月，供货温度为 -20 至 -80°C。1 个月，复溶后在无菌条件下 2 至 8°C。3 个月，重构后在无菌条件下 -20 至 -80°C。

蛋白酶 K 储备液 - 20 mg/ml （下载 PDF 格式）

指示

1） Tris-CaCl2缓冲液 PH8.0（200 mM Tris PH8.0 + 3 mM CaCl2)

1. 量取 5 ml 不含 RNase 的 200mM Tris 缓冲液 （pH 8.0）。

2. 添加 1.66 毫克（3 mM）氯化钙 （CaCl2） 添加到 Tris Buffer 并溶解。

2） 5ml 储备液 （20mg/ml）

1. 测量 2.5 ml Tris-CaCl2将缓冲液 （pH 8.0） 放入离心管中。

2. 添加 100 mg 蛋白酶 K （YPK-K-100GM）。

3. 轻轻混匀以溶解蛋白酶 K。

4. 用 0.22 μm 过滤器对溶液进行消毒。

5. 用 100% 甘油填充至 5 ml 的最终体积（添加 2.5 ml 甘油）。

6. 混合直至溶解。

在 -20°C 下分装储存 1 年。

3） 建议工作浓度：0.05~1mg/ml

注意：蛋白酶 K 与核酸酶相互作用。为确保最大的蛋白酶 K 活性，请使用经 0.1% DEPC 处理的水